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microRNA-23a对染氟成骨肉瘤细胞外调节蛋白激酶通路的影响

【作者】杨璐珲 卢明丽 陈宣好 王楠兰 韦艳

【关键词】 miR-23a; 细胞外调节蛋白激酶(ERKs)通路; 细胞外信号调节激酶(ERK);

摘要目的探究miR-23a对染氟大鼠成骨肉瘤(UMR-106)细胞外调节蛋白激酶(ERKs)通路的影响。方法体外培养UMR-106细胞,分别转染miR-23a的激动剂(mimics)和抑制剂(inhibitor),再以0、80μmol/L NaF对细胞进行染毒,培养24 h后利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ERKs通路关键因子细胞外信号调节激酶(ERK)、血清效应因子(SRF)、c-fos mRNA的表达水平;培养48 h后利用免疫蛋白印记法(Western blot)检测ERKs通路关键因子ERK、ETS样蛋白1(Elk-1)、SRF、c-fos蛋白的表达水平。结果与空白对照组比较,NaF组ERK、SRF、c-fos的mRNA和蛋白表达水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。转染miR-23a激动剂后,与miR-NC组比较,过表达组miR-23a、SRF mRNA表达水平上升(P<0.05),ERK、Elk-1、SRF蛋白表达水平上升(P<0.05),c-fos mRNA和蛋白表达变化不显著(P>0.05);转染mi R-23a抑制剂后,与Inhibitor NC组相比,抑制组miR-23a、ERK、SRF、c-fos mRNA表达水平降低(P<0.05),ERK、Elk-1、SRF、c-fos蛋白表达水平降低(P<0.05);转染miR-23a激动剂联合NaF作用下,与过表达组比较,过表达+NaF组ERK、SRF、cfos mRNA表达水平升高(P<0.05),ERK、Elk-1、c-fos蛋白表达水平升高(P<0.05);转染mi R-23a抑制剂联合NaF作用下,与抑制组比较,抑制+NaF组ERK、c-fos mRNA表达水平升高(P<0.05),ERK、SRF、c-fos蛋白表达水平上升(P<0.05)。结论 miR-23a能激活染氟UMR-106细胞ERKs通路途径。

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