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邻苯二甲酸单丁酯和邻苯二甲酸单乙基己酯联合染毒对小鼠睾丸间质细胞自噬水平的交互作用

【作者】伊梦楠 李玲 德小明 李丽萍 张亚娟 张鹏举 员朋娟 翁晓梦

【关键词】 邻苯二甲酸单丁酯 邻苯二甲酸单乙基己酯 联合染毒 交互作用 小鼠睾丸间质细胞 自噬作用

摘要目的探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)染毒对小鼠睾丸间质细胞的自噬的影响以及MBP+MEHP联合染毒的交互作用分析。方法将处于对数生长期的TM-3细胞分别暴露于0(对照)和400μmol/L的MBP、MEHP及400μmol/L MBP+400μmol/L MEHP溶液中;染毒24、36、48 h后,采取CCK-8法检测细胞的存活率;染毒24 h后,采用单丹黄酰尸胺(MDC)免疫荧光法检测细胞自噬囊泡的荧光信号强度;染毒24 h后,采用Western blot法检测自噬标志蛋白LC3和p62的表达水平。结果与对照组相比,MBP和(或)MEHP染毒TM-3细胞的存活率均下降,自噬囊泡的荧光信号强度均增高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。MBP和MEHP联合染毒对TM-3细胞的存活率、自噬囊泡的荧光信号强度、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p62蛋白表达水平具有交互作用,具体均表现为拮抗作用(P<0.01)。结论MBP和(或)MEHP体外染毒均可诱导TM-3细胞自噬水平升高,MBP和MEHP联合染毒交互作用表现为拮抗作用。

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